一、標(biāo)準(zhǔn)操作流程

　　樣本準(zhǔn)備：從人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系中提取基因組DNA，確保樣本具有代表性且細(xì)胞數(shù)量充足。DNA提取可使用商用試劑盒或傳統(tǒng)有機(jī)溶劑法，提取后需檢測DNA濃度和純度，以滿足后續(xù)檢測要求。

　　STR位點擴(kuò)增：選取人類基因組中高度多態(tài)性的13-24個STR位點，如TH01、TPOX、vWA等，使用特異性引物和PCR技術(shù)擴(kuò)增這些位點。引物通常標(biāo)記熒光，便于后續(xù)檢測。

　　電泳分離與檢測：將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行毛細(xì)管電泳分離，利用熒光檢測系統(tǒng)（如ABI3500遺傳分析儀）檢測電泳分離后的STR片段長度，生成電泳圖譜。

　　數(shù)據(jù)分析：根據(jù)電泳圖譜分析各STR位點的等位基因（片段長度），生成細(xì)胞系的STR基因型。將獲得的STR基因型與已知細(xì)胞系的STR數(shù)據(jù)庫（如ATCC、DSMZ等）進(jìn)行比對，確認(rèn)細(xì)胞系身份或檢測是否存在交叉污染。

　　二、結(jié)果解讀指南

　　匹配度判定：若受檢細(xì)胞STR位點的基因分型數(shù)據(jù)與其對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系匹配度≥80%，則判定為標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系或其衍生細(xì)胞系；若匹配度在56%-80%之間，需結(jié)合細(xì)胞系形態(tài)、特異性標(biāo)記物等輔助分析進(jìn)行綜合判斷；若匹配度≤56%，則判定與其對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系不相關(guān)。

　　多等位基因分析：人源細(xì)胞STR圖譜上，一個基因位點通常只出現(xiàn)1個或2個峰（純合或雜合）。若出現(xiàn)3個及以上峰，可能提示存在同源物種交叉污染或三倍體等多倍體突變現(xiàn)象。

　　交叉污染檢測：通過比對多個細(xì)胞樣本的STR基因型，可檢測是否存在細(xì)胞系間的交叉污染。若檢測到混合樣本中的不同STR基因型，則確認(rèn)存在多種細(xì)胞來源。